co-ip图怎么看

CO-IP后做质谱实验分组的设计

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法,通过使用诱饵蛋白(IP中的抗原,bait protein)特异性抗体间接捕获与其结合的靶蛋白(prey protein)。在免疫沉淀串联质谱(IP-MS)...

如何去除 IP/Co-IP中的重轻链干扰?

一、IP/Co-IP重轻链干扰怎么来的?IP实验分成两个部分(免疫沉淀IP+WB)。免疫沉淀部分:在含A蛋白细胞裂解液中加入A蛋白抗体(IP抗体),再加入琼脂糖珠/磁珠,形成“A蛋白+IP抗体+磁珠/琼脂糖珠”复合物,通过离心沉淀或着...

年后第一个 CO-IP 实验,背景深得发慌,要恶补的功课都在这里了

师姐救我,过完年回来,CO-IP 手生了,一样的操作复制不出你年前带我做的结果了。丁香园联合 IBA Lifesciences开展主题为「集思广益,从原理到实践:一键掌握蛋白互作研究方法」的线上直播,从原理…

【开讲啦】研究蛋白-蛋白相互作用之Co-IP protocol_

本protocol详细描述了如何在烟草叶片中瞬时表达蛋白和完成免疫共沉淀(Co-IP)实验,适用于蛋白纯化、研究蛋白-蛋白相互作用以及其他蛋白相关实验。材料和试剂 1.烟草种子 2.已转入双元载体(如pCAMBIA1300、pBIN19等,靶基因...

CO-IP 具体步骤及常见问题(上)

Co-IP 常见问题:1️⃣CO-IP 背景较深或条带杂乱-固相基质的非特异性结合一抗体结合非特异的蛋白-洗涤不当造成杂带-pre clear 或者更换磁珠,设置对照排除非特异性条带;优化缓冲液 2️⃣Input 条带清晰,co-IP 条带很弱?设X...

免疫共沉淀Co-IP原理与操作

Co-IP原理简图 琼脂糖珠 长久以来,多孔的琼脂糖珠(也称琼脂糖树脂)作为免疫沉淀实验中的固相支持物常用的材料。琼脂糖珠海绵状的结构(直径 50-150 μm)可以快速高效结合抗体(继而结合靶蛋白)。这种结构可使其获得较高的...

CO-IP/IP免疫共沉淀,手把手带教

我们今天来看看CO-IP/IP免疫共沉淀的具体操作 免疫共沉淀(CO-Immunoprecipitation)和免疫沉淀(IP,Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。CO-IPIP的实验过程很相似,...

CO-IP产物质谱鉴定要注意什么?知乎

运用LC-MS/MS技术对Co-IP所捕获的蛋白产物进行鉴定分析,LC-MS/MS方法具有更高的灵敏度和几乎100%的可靠性,是主流文献中最常用的方法。服务特色 免疫共沉淀及质谱一体化操作,一站式解决免疫沉淀及后续实验中的问题。戴安生物...

转染与Co-IP-

二、Co-IP 以HA-X和FLAG-Y为例 HA-X+-+ FLAG-Y-+ 1.中瓶细胞长满之后铺于小皿中,一个中瓶铺6个小皿。2.待细胞长到60%-80%时开始转染,2个质粒各转4μg,总共转8μg质粒。3.转染步骤参考上文。收样 转染后36-30h收样 1.每个小...

Co-IP质谱分析

Co-IPCo-Immunoprecipitation)免疫共沉淀技术,是一种基于抗体与抗原特异结合的原理发展起来的用于研究体内蛋白质相互作用的经典方法。该技术使用非变性剂裂解细胞,保留细胞中蛋白质A-蛋白质B间的相互作用,再将其与蛋白A...